產(chǎn)品介紹：

本試劑盒適用于從革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌中提取高純度總DNA，每次可處理106-108個(gè)細(xì)胞，獲得多至20 μg的總DNA。純化過程中不需苯酚或氯仿等有毒溶劑，無(wú)需乙醇沉淀，一小時(shí)內(nèi)即可獲得高純度DNA。本試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系使裂解液中的DNA高效特異的結(jié)合到硅基質(zhì)離心吸附柱上，而其他污染物可流過膜，PCR和其他酶促反應(yīng)的抑制劑可通過兩步洗滌步驟被有效去除，最后使用低鹽緩沖液或水洗脫，即可獲得高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-TimePCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern Blot、分子標(biāo)記等下游實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) Bacteria Genomic DNA提取試劑

產(chǎn)品貨號(hào)：CW0552S

產(chǎn)品組份：

產(chǎn)品使用說(shuō)明：

實(shí)驗(yàn)步驟：

以革蘭氏陰性菌基因組DNA的提取為例

1．取細(xì)菌培養(yǎng)物1-5 ml（106-108個(gè)細(xì)胞，最多不超過2×109個(gè)細(xì)胞）置于離心管（自備）中，12,000 rpm（~13,400×g）離心1分鐘，盡量吸凈上清。

2．向沉淀中加入180 μl Buffer GTL，振蕩使菌體重懸。

3．加入20 μl Proteinase K，渦旋混勻，56℃孵育，直至溶液變清亮，孵育過程中每隔一段時(shí)間顛倒或震蕩離心管使樣本分散。

4．加入200 μl Buffer GL，渦旋震蕩充分混勻。加200 μl無(wú)水乙醇，渦旋震蕩充分混勻。短暫離心，使管壁上的溶液收集到管底。

5．將步驟4所得溶液（包括形成的沉淀）全部加入到已裝入收集管的吸附柱（Spin

Columns DM）中，若一次不能加完溶液，可分多次轉(zhuǎn)入。12,000 rpm離心1分鐘，棄廢液，將吸附柱放回收集管中。

6．向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1（使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。

7．向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2（使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。

8．12,000 rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫?cái)?shù)分鐘，以*晾干。

9．將吸附柱置于一個(gè)新的離心管中，向吸附柱的中間部位懸空加入50-200 μl Buffer

GE，室溫放置2-5分鐘，12,000 rpm離心1分鐘，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。

以革蘭氏陽(yáng)性菌基因組DNA的提取為例

1．取細(xì)菌培養(yǎng)物1-5 ml（106-108個(gè)細(xì)胞，最多不超過2×109

個(gè)細(xì)胞）置于離心管（自備）中，12,000 rpm（~13,400×g）離心1分鐘，盡量吸凈上清。

2．加入180 μl Enzymatic Lysis Buffer（自備）使菌體重懸。

3．37℃孵育30分鐘。

4．加入20 μl Proteinase K渦旋震蕩，充分混勻。加入200 μl Buffer GL，渦旋震蕩混勻。

5．56℃孵育30分鐘。

2）如需去除RNA，可在上述步驟完成后，加入4 μl濃度為100 mg/ml的RNase A溶液（貨號(hào)：CW0601S），震蕩混勻，室溫放置5-10分鐘。

6．加入200 μl無(wú)水乙醇，渦旋震蕩充分混勻。

7．將步驟6所得溶液（包括形成的沉淀）全部加入到已裝入收集管的吸附柱（Spin

Columns DM），若一次不能加完溶液，可分多次轉(zhuǎn)入。12,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

8．向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1（使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

9．向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2（使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

10.12,000 rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫?cái)?shù)分鐘*晾干。

11.將吸附柱置于一個(gè)新離心管（自備）中，向吸附柱中間部位懸空加入50-200 μl Buffer GE，室溫放置2-5分鐘，12,000 rpm離心1分鐘，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。

儲(chǔ)存與運(yùn)輸：

室溫（15-30℃）

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

品牌             貨號(hào)                   名稱                      規(guī)格

康為世紀(jì)   CW0552M   Bacteria Genomic DNA Kit   200 preps

產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) Bacteria Genomic DNA提取試劑

產(chǎn)品貨號(hào)：CW0552S

關(guān)于公司：

康為世紀(jì)生物科技股份有限公司是一家立足于生命科學(xué)領(lǐng)域，有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國(guó)家優(yōu)良企業(yè)，主要從事高附加值、高技術(shù)含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn)，為生命科學(xué)研究、基因檢測(cè)和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務(wù)。公司曾先后被評(píng)為國(guó)家優(yōu)良企業(yè)、江蘇省科技型中小企業(yè)、江蘇省瞪羚企業(yè)、江蘇省民營(yíng)科技企業(yè)。公司建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的技術(shù)創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺(tái)，構(gòu)建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。

產(chǎn)品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護(hù)劑、分子診斷檢測(cè)試劑等，打破了中國(guó)生物研究與產(chǎn)業(yè)對(duì)進(jìn)口試劑的依賴。

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