產(chǎn)品簡介：

HS Probe qPCR預混試劑是一款適用于探針法的Real time PCR（qPCR）反應的通用試劑。包含了除模板，引物，探針外所有的組分。優(yōu)選的熱啟動Taq DNA polymerase，配合針對低拷貝模板而優(yōu)化的緩沖液，可以有效抑制非特異性擴增，大大增加qPCR擴增效率以及檢測靈敏度，適用于進行高靈敏度的qPCR反應。參比染料rox隨試劑盒提供。

本產(chǎn)品使用前只需要加入引物、模板、探針、ROX（根據(jù)使用的機型而定）、水；利用本產(chǎn)品可在廣泛的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標準曲線，對靶基因進行準確的定量、定性和SNP檢測，具有重復性好、可信度高、并兼容各種不同類型的qPCR探針的特點。

產(chǎn)品名稱：紅榮微再 HS Probe qPCR預混試劑

產(chǎn)品貨號：RF-Q3001

產(chǎn)品應用：

基因表達分析

• 地拷貝基因檢測

• SNP和等位基因分型

• 測序和微陣列結(jié)果的驗證

儲存與運輸：

1. 冰上運輸

2. 到貨后-20℃恒溫冷凍冰箱避光保存。

常用Q&A:

Q: 擴增曲線異常

1、擴增曲線不光滑：

系統(tǒng)需要校正，提高模板濃度；

ROX 使用錯誤，更換正確的ROX 類型。

2、擴增曲線斷裂或下滑：

模板濃度高，提高閾值并重新分析數(shù)據(jù)；

降低模板濃度。

3、個別擴增曲線驟降：

反應管有氣泡。處理樣本時注意離心。

Q：反應結(jié)束無擴增曲線

1、循環(huán)數(shù)不夠：一般設40 個循環(huán)，但要注意過多循環(huán)數(shù)增加背景信號，降低數(shù)據(jù)可信度。

2、確認程序中是否設置信號采集：兩步法的擴增程序一般在退火/延伸階段采集信號；三步法擴增信

號采集設置在延伸階段。

3、引物降解：PAGE 檢測排除其降解的可能性。

4、模板濃度太低：減少稀釋度重復實驗，先從高濃度做起。

5、模板降解：重新制備模板。

Q: Ct 值太高

1、擴增效率低：優(yōu)化反應條件，嘗試三步法擴增，或重新設計合成引物。

2、模板濃度低：減少稀釋度，先從高濃度做起。

3、模板降解：重新制備模板。

4、PCR 產(chǎn)物太長：推薦 PCR 產(chǎn)物長度 80-150 bp。

5、存在 PCR 抑制劑：若為模板帶入，加大模板稀釋倍數(shù)或重新制備模板。

Q：陰性對照出現(xiàn)明顯擴增

1、反應體系污染：更換新的Mix、水、引物等重復實驗；反應體系在超凈工作臺內(nèi)配制，減少氣溶膠污染。

2、引物設計不合理：重新設計并合成引物。

產(chǎn)品名稱：紅榮微再 HS Probe qPCR預混試劑

產(chǎn)品貨號：RF-Q3001

關(guān)于公司：

紅榮微再作為RNA、NGS、ctDNA、qPCR的分子診斷專業(yè)供應商，以“傳遞科學價值，服務科學研究"為宗旨,努力為客戶提供質(zhì)量可靠、貨美價優(yōu)的分子診斷試劑耗材，與客戶攜手為中國分子診斷的發(fā)展而前行。

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